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已有证据表明,微生物确实能在液氮中存活,并且在一定条件下会引起交叉污染。目前精液标本交叉污染的问题越来越受到人类精子库及临床生殖中心重视,希望通过一定的预防手段将这种交叉污染的风险降至最低限度。
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交叉污染的影响 因素:6 @( y; e- g) t( w
为了减少贮存样本间通过贮存容器交叉污染传染性微生物(如HIV、乙肝、丙肝病毒),需考虑下列几个方面: 1 q" T; v4 o! U0 u
存储容器的类型:冻存管或麦管和他们的封口方法。
0 f% d6 _: M+ I G存储介质:液氮或者液氮蒸气。 # n* V- l+ J6 Y
对高危险样本(已知感染病毒或怀疑感染病毒样本)使用的存储方法和程序。 " @. \1 k3 n- u5 [0 P5 v( f4 T1 K b5 g
P) q v# m2 M! L. Y! C降低交叉污染风险的措施& W3 ?# Y' Z7 |) Y
( [* D' \% g8 I一、用液氮蒸气贮存样本 1 a( N7 T- \! H7 l: p/ u: b# N
液氮蒸气贮存样本能够有效减少交叉感染的风险,然而,使用该方法贮存精液标本,有时可能达不到-100℃,所以当使用液氮蒸气来贮存样本时,必须确保温度低于-130℃,尽量避免温度对冷冻精液的损害。# b2 \; [2 P5 t j5 x8 F3 R) @
. `: h. y! \/ k; G4 V2 R 二、样品包装的改进
6 h: v4 R8 s: ?使用一种热封口膜,覆盖在冻存管上,可以解决冻存管密封性不强,长期贮存液氮容易进入管内的问题,从而防止由于液氮引起的交叉污染,该方法无需改变目前的贮存方式。也可使用高效安全的麦管来分装精液标本,两端通过热封口,使内部精液不直接接触液氮,减少由于液氮引起的交叉污染。" E6 y/ b, I- ?* a+ s- @9 N
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三、使用标本贮存隔离罐
& [9 E+ z5 \- e: N# c. {/ X ]精子库在对供精志愿者的疾病检测结果出来以前,把精子保存在隔离罐中,包括对经过筛选的供精志愿者也进行同样操作,只有被证明是“清洁”的样品才能转移到长期储存罐中。有些精子库对新冻存的精液标本首先放在隔离罐,每3个月换一个罐,直到这个罐中所有的供精志愿者都是病毒检测阴性的,才能将样品转移,如果有一个样品的病毒检测是阳性的,那么这个罐中所有的样品都必须销毁,并且对该液氮罐进行彻底消毒。这一方法非常谨慎和安全,但会造成有价值的精液浪费,并且并不能完全避免其他途径造成的微生物污染。
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f) T) y. F e R# u& @ 四、程序冷冻仪的消毒
+ f+ j; G4 {9 | \& }程序冷冻仪作为冷冻精子的仪器,在冷冻过程中同样存在交叉污染的危险,程序冷冻仪并不是无菌的,液态和气态的液氮都会是潜在的微生物污染源,环境中存在的微生物会引起程序冷冻仪的污染。除了对程序冷冻仪的内部进行消毒外,所有其他与样品进行接触的部件都要消毒。
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